粗长道具进菊羞耻调教,人人狠狠综合久久88成人,色婷婷亚洲精品综合影院,国产成人精品无码免费视频

歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站

返回首頁|聯(lián)系我們

全國統(tǒng)一服務(wù)熱線:

15201736385
技術(shù)文章您當前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 大鼠牙乳細胞提取物?培養(yǎng)步驟

大鼠牙乳細胞提取物?培養(yǎng)步驟

日期:2024-06-27瀏覽:1434次

大鼠牙乳細胞提取物培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

 

上一篇:2型神經(jīng)纖維瘤抗體的標記實驗要點

下一篇:以下將詳細探討磷酸鹽緩沖液的應(yīng)用范圍

在線客服 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

021-59989018

掃一掃,關(guān)注我們

色综合色狠狠天天综合网| 久久99国产精一区二区三区| 日韩gay小鲜肉啪啪18禁| 欧美 亚洲 国产 另类| 国产精品www夜色视频| 香蕉欧美成人精品A∨在线观看| 成人欧美一区二区三区在线| 国产毛a片啊久久久久久保和丸| 我和亲妺在客厅作爱| 免费看国产曰批40分钟| 女人十八片毛片免费视频| 亚洲啪av永久无码精品放毛片| 国产精品成人精品久久久| 无码av天天av天天爽| 国产男女猛烈无遮挡免费网站| 亚洲gv猛男gv无码男同网站| 张柏芝跪下吃j8图片| 97人伦影院a级毛片| 蜜臀AV性久久久久蜜臀AⅤ| 亚洲色婷婷一区二区三区| 国产av无码专区亚洲av| 被按摩师玩弄到潮喷在线播放| 国产成人无码一区二区三区在线| 全国最大成人网站| 玩两个丰满老熟女在线视频| 丰满人妻中伦妇伦精品app | 精品无码人妻一区二区三区| 中国熟妇色xxxxx中国学生| 粉嫩极品国产在线观看| 亚洲JLZZJLZZ少妇| 国产av一区二区三区| 一本加勒比hezyo无码资源网| 777久久精品一区二区三区无码| 看着娇妻被一群人蹂躏| 国产AⅤ激情无码久久久无码| 久久精品国产www456c0m| 影音先锋中文字幕人妻| yw尤物av无码国产在线观看| 亚洲精品国产成人| 国产精品18久久久久久麻辣| 永久免费a∨片在线观看|